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诊断学第七版教材-第59部分
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称组织细胞、巨噬细胞）。胞体大小变异甚大，直径15～50弘m，有时可至80肛m。细胞外
形呈圆形、椭圆形或不规则形。胞核呈圆形、椭圆形、肾形或不规则形，偏位。核染色质
较粗、深染，或疏松、淡染，呈网状结构。可见核仁或无核仁。胞质丰富，呈不透明灰蓝
色或蓝色，不含颗粒或有少量嗜天青颗粒，常见有小空泡。
6．巨核细胞系统
（1）原巨核细胞（megakaryoblast，原始型巨核细胞）：细胞呈圆形或椭圆形，胞体较
大，直径15～30p．m。胞核大，占细胞的极大部分，呈圆形或椭圆形。’染色质呈深紫红色，
粗粒状，排列紧密。可见淡蓝色核仁2～3个，核仁大小不一，不清晰。胞质量较少，呈
不透明深蓝色，边缘常有不规则突起。
（2）幼巨核细胞（proInegakaryocyte，幼稚型巨核细胞）：细胞呈圆形或不规则形，
胞体明显增大，直径30～50弘m。胞核开始有分叶，核形不规则并有重叠。染色质凝聚呈
粗颗粒状或小块状，排列紧密。核仁模糊或消失。胞质量增多，呈蓝色或灰蓝色，近核处
可出现淡蓝色或淡红色淡染区，可有少量嗜天青颗粒。
（3）颗粒型巨核细胞（granular Inegakaryocyte，过渡型巨核细胞）：胞体明显增大，
直径50～70／xm，甚至达100弘m，外形不规则。胞核明显增大，高度分叶，形态不规则，
分叶常层叠呈堆集状。染色质粗糙，排列致密呈团块状，染深紫红色。胞质极丰富，呈淡
紫红色，其内充满大量细小紫红色颗粒，有时可见边缘处颗粒聚集成簇，但周围无血小板
形成。
（4）产血小板型巨核细胞（thronbocytogenotJs rnegakaryc）cyte，成熟型巨核细胞）：
胞质内颗粒明显聚集成簇，有血小板形成，胞质周缘部分已裂解为血小板脱落，使细胞边
缘不完整，其内侧和外侧常有成簇的血小板出现。其余的细胞特征均与颗粒型巨核细胞
相同。
（5）巨核细胞裸核（na。ked nucleus）：产血小板型巨核细胞的胞质裂解成血小板完全
脱落后，仅剩细胞核时，称为裸核。
7．其他细胞 骨髓中还可以见到网状细胞、内皮细胞、纤维细胞、组织嗜碱细胞、
成骨细胞、破骨细胞及一些退化细胞如退化的淋巴细胞、Ferrata细胞、退化破坏的嗜酸
性粒细胞等。
三、血细胞的细胞化学染色
细胞化学染色是以细胞形态学为基础，根据化学反应原理，应用骨髓涂片按一定程序
染色，然后在显微镜下观察细胞化学成分及其变化的一项检查方法。各种类型血细胞中的
化学成分、含量及其分布不尽相同，在病理情况下，也可发生改变。因此，细胞化学染色
有助于了解各种血细胞的化学组成及病理生理改变，可用作血细胞类型的鉴别，以及对某
些血液病的诊断和鉴别诊断、疗效观察、发病机制探讨等有一定价值。
细胞化学染色的方法较多，主要介绍常用的酶类、脂类、糖原、铁等细胞化学染色。
（一）过氧化物酶染色
【原理】 血细胞中的过氧化物酶（peroxidase，Pox）能分解试剂中的底物H。o。，释
出新生态氧，使无色联苯胺氧化为蓝色联苯胺，后者与亚硝基铁氰化钠结合形成蓝黑色的
第二章｜临睬血液学检溅
颗粒，沉着于细胞质中。
【结果】胞质中无蓝黑色颗粒者为阴性反应，出现细小颗粒、分布稀疏者为弱阳性反
应，颗粒粗大而密集者为强阳性反应。
【临床意义】主要用于急性白血病类型的鉴别。急性粒细胞白血病时，白血病细胞多
呈强阳性反应；急性单核细胞白血病时呈弱阳性或阴性反应；急性淋巴细胞白血病则呈阴
性反应。POX染色对急性粒细胞白血病与急性淋巴细胞白血病的鉴别最有价值。
（二）苏丹黑B染色
【原理】 苏丹黑B（sudan black B，sB）是一种脂溶性染料，可溶于细胞质内的含脂
物质，使胞质中的脂类物质呈棕黑色或深黑色颗粒。
【结果】结果与PoX染色大致相同。粒细胞系自早幼粒细胞起至成熟中性粒细胞，阳
性反应随细胞的成熟逐渐增强。单核细胞系大多呈弱阳性反应。淋巴细胞系呈阴性反应。
【临床意义】 同Pox染色反应。
（三）中性粒细胞碱？陛磷酸酶染色
【原理】 中性粒细胞碱性磷酸酶（neutrophil alkaline phosphatase，NAP）的显示方
法有偶氮偶联法和钙一钴法两种。前者的染色原理是血细胞内碱性磷酸酶在pH为9．4～
9．6的条件下，将基质液中的a一磷酸萘酚钠水解，产生n一萘酚与重氮盐偶联形成灰黑色
沉淀，定位于细胞质内酶活性所在之处。钙一钴法染色是碱性磷酸酶在碱性条件下将基质
液中的p一甘油磷酸钠水解，产生磷酸钠。磷酸钠依次与硝酸钙、硝酸钴、硫化胺发生反
应，形成不溶性棕黑色的硫化钴，定位于酶活性之处。
【结果】碱性磷酸酶主要存在于成熟阶段的中性粒细胞（分叶核及杆状核），其他血
细胞均呈阴性反应。阳性反应为胞质中出现灰色到棕黑色颗粒，反应强度分为5级，即
“一”、“1＋”、“2＋”、“3＋”、“4＋''o反应结果以阳性反应细胞百分率和积分值来表示。
血涂片染色后，在油浸镜下，观察100个成熟中性粒细胞，阳性反应细胞所占百分率即为
阳性率；对所有阳性反应细胞逐个按反应强度分级，将各级所占的百分率乘以级数，然后
相加，即为积分值。
【参考值】成人NAP阳性率10％～40％；积分值40～80（分）。由于各实验室条件
不同，参考值也有差异。应建立本实验室的参考值。
【临床意义】NAP活性可因年龄、性别、应激状态、月经周期、妊娠及分娩等因素
有一定的生理性变化。在病理情况下，NAP活性的变化常有助于某些疾病的诊断和鉴别
诊断。
1．感染性疾病 急性化脓菌感染时NAP活性明显增高，病毒性感染时其活性在正常
范围或略减低。
2．慢性粒细胞白血病的NAP活性明显减低，积分值常为O。类白血病反应的NAP活
性极度增高，故可作为与慢性粒细胞白血病鉴别的一个重要指标。
3．急性粒细胞白血病时NAP积分值减低；急性淋巴细胞白血病的NAP积分值多增
高；急性单核细胞白血病时一般正常或减低。
4．再生障碍性贫血时NAP活性增高；阵发性睡眠性血红蛋白尿时活性减低，因此也
可作为两者鉴别的参考。
5．其他血液病：恶性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、骨髓增殖性疾病如真性红细胞
增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化症等NAP活性中度增高，恶性组织细胞病时
NAP活性降低。
6．腺垂体或肾上腺皮质功能亢进，应用肾上腺皮质激素、ACTH、雌激素等NAP积
分值可增高。
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（四）酸性磷酸酶染色
【原理】 酸性磷酸酶（acid phoshatase，ACP）染色法有硫化铅法和偶氮偶联法。硫
化铅法原理为血细胞内的酸性磷酸酶等在酸性条件下（pH5．O）将基质液中的p甘油磷酸
钠水解，产生磷酸钠，然后与硝酸铅反应，生成磷酸铅沉淀，再与硫化铵反应形成棕黑色
硫化铅沉淀，定位于细胞质内。
【结果】胞质内出现棕黑色颗粒者为阳性反应。
【临床意义】
1．协助诊断多毛细胞白血病（hairy cell leukemia，HcL）。多毛细胞白血病时多毛细
胞AcP呈阳性或强阳性反应，且其活性不被L一酒石酸所抑制，有助于对本病的诊断。
2．协助鉴别T淋巴细胞与B淋巴细胞。T淋巴细胞呈阳性反应，B淋巴细胞呈阴性
反应，有助于急性淋巴细胞白血病的免疫学分型。
3．协助鉴别Gaucher病与Niemann—Pick病。Galacher。细胞AcP呈阳性，而Nie—
mann—Pick细胞为阴性反应。
4．单核细胞、组织细胞、网状细胞、巨核细胞AcP染色均呈阴性反应。
（五）氯化醋酸AS—D萘酚酯酶染色
【原理】 血细胞内氯化醋酸AS—D萘酚酯酶（naphth01 AS—D chlot’oacetate esterase，
As—D NCE）又称特异性酯酶（specific esterase，SE）、粒细胞酯酶。此酶能将基质液中
的氯化醋酯AS—D萘酚水解，产生萘酚As—D，进而与重氮盐GBC偶联，形成不溶性红色
沉淀，定位于细胞质内。 ，
【结果】胞质中出现红色沉淀者为阳性反应。此酶主要存在于粒系细胞中，原粒细胞
为阴性反应或弱阳性反应，自早幼粒细胞至成熟中性粒细胞均呈阳性反应，早幼粒细胞呈
强阳性反应，酶活性随细胞的成熟而逐渐减弱。嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、浆
细胞、幼红细胞一般均呈阴性反应，个别单核细胞可呈弱阳性反应。
【临床意义】 急性粒细胞自血病时原粒细胞和早幼粒细胞酶活性明显增强，AS—D
NcE染色呈强阳性反应；急性单核细胞白血病及急性淋巴细胞白血病时均呈阴性反应；
急性粒一单核细胞白血病时，部分白血病细胞（粒系）呈阳性反应，而有些白血病细胞
（单核系）呈阴性反应。
（六）a一醋酸萘酚酯酶染色
【原理】 0c一醋酸萘酚酯酶（alpha—naphthol acctate esterase，d—NAE）又称非特异性
酯酶（non—specl‘fic esterase，NSE），能将基质液中的a一醋酸萘酚水解，产生a一萘酚，再
与重氮染料偶联，形成不溶性的有色沉淀，定位于胞质内。
【结果】胞质中出现有色沉淀者为阳性反应。因所用的重氮盐不同，阳性反应的沉淀
可分灰黑色或棕黑色。此酶主要存在于单核系细胞中，故有人称之为单核细胞型酯酶。原
单核细胞为阴性反应或弱阳性反应，幼单核细胞和单核细胞呈阳性反应。粒系细胞一般为
阴性或弱阳性反应。淋巴细胞一般为阴性反应。
【临床意义】急性单核细胞白血病细胞呈强阳性反应，但单核细胞中的酶活性可被氟
化钠（NaF）抑制，故在进行染色时，常同时做氟化钠抑制试验。急性粒细胞白血病时，
呈阴性反应或弱阳性反应，但阳性反应不被氟化钠抑制。因此，本染色法主要用于急性单
核细胞白血病与急性粒细胞白血病的鉴别。
（七）糖原染色
【原理】糖原染色，又称过碘酸…Sctlift反应（per‘iodic：acid—Schiff’s reactiorl，PAS
反应）。过碘酸能将血细胞内的糖原氧化，生成醛基。醛基与Schiff液中的无色品红结合，
募二章｜I
临床血液学检测
形成紫红色化合物，定位于胞质内。
【结果】 胞质中出现红色者为阳性反应。阳性反应物可呈颗粒状、小块状或弥漫均匀
红色。PAS反应的阳性程度通常以强阳性、阳性、弱阳性和阴性来表示。也有用阳性百分
率（观察同一类型细胞的阳性细胞率）和积分值来表示。
正常血细胞的PAS染色反应：粒系细胞中原粒细胞为阴性反应，自早幼粒细胞至中
性分叶核粒细胞均呈阳性反应，并随细胞的成熟，阳性反应程度渐增强；单核细胞呈弱阳
性反应；淋巴细胞大多呈阴性反应，少数可呈弱阳性反应；幼红细胞和红细胞均呈阴性反
应；巨核细胞和liltd；板均呈阳性反应，巨核细胞的阳性反应程度随细胞的发育成熟而增
强，成熟巨核细胞多呈强阳性反应。
【临床意义】
1．红血病或红白血病时幼红细胞呈强阳性反应，积分值明显增高，有助于与其他红
细胞系统疾病的鉴别，严重缺铁性贫血、重型海洋性贫血及巨幼细胞贫血，部分病例的个
别幼红细胞可呈阳性反应。
2．急性粒细胞白血病，原粒细胞呈阴性反应或弱阳性反应，阳性反应物质呈细颗粒
状或均匀淡红色；急性淋巴细胞白血病原淋和幼淋细胞常呈阳性反应，阳性反应物质呈粗
颗粒状或块状；急性单核细胞白血病原单核细胞大多为阳性反应，呈弥漫均匀红色或细颗
粒状，有时在胞质边缘处颗粒较粗大。因此，PAS反应对三种急性白血病类型的鉴别有一
定参考价值。
3．其他巨核细胞PAS染色呈阳性反应，有助于识别不典型巨核细胞，如急性巨核
细胞白血病（M，）和MDS中的小巨核细胞；Gaucher细胞PAS染色呈强阳性反应，有助
于与Niemann—Pick细胞鉴别；腺癌细胞呈强阳性反应，骨髓转移时PAS染色可帮助与白
血病细胞鉴别。
几种常见类型急性白血病的细胞化学染色结果见表4…2…6。
表4—2—8几种常见急性白血病的细胞化学染色结果
（八）铁染色
【原理】人体内的铁有一定量以铁蛋白和含铁血黄素的形式贮存在骨髓中的单核一吞
噬细胞胞质内，幼红细胞的线粒体中也含有含铁血黄素。这些铁在酸化的低铁氰化钾溶液
中反应，生成蓝色的铁氰化铁沉淀（普鲁士蓝），定位于含铁的部位。故此染色法又称为
普鲁士蓝反应。
【结果】
1．细胞外铁 观察骨髓小粒中贮存在单核一吞噬细胞系统内的铁（在幼红细胞之外的
铁）。阳性反应为骨髓小粒上见到的呈浅蓝绿色均匀的无形物质，或呈蓝色或深蓝色的小
珠状、粗颗粒状或蓝黑色的小块物质，按阳性反应的强度分为5级：
“一”骨髓小粒无蓝色显现（提示骨髓贮存铁缺乏）。
“1＋”有少量铁颗粒，或偶见少量铁小珠。
“2＋”有较多的铁颗粒和铁小珠。
“3＋”有很多铁颗粒、小珠和少数蓝黑色小块。
“4＋”有极多的铁颗粒和小珠，并有很多密集成堆的小块。
2．细胞内铁 为幼红细胞内的铁。正常幼红细胞（主要是晚幼红细胞）的细胞核周
围可见到1～5个呈蓝色的细小铁颗粒。含有铁颗粒的幼红细胞称为铁粒幼细胞。在油浸
镜下，连续计数100个幼红细胞，记录铁粒阳性的幼红细胞数，即为铁粒幼细胞所占的百
分率。需同时注意细胞内的铁粒数目、大小、染色深浅和排列。如含粗大深染的铁粒在
10个以上，并环绕细胞核排列超过核周径2／3以上者�
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